L'osteoartrite (OA) hè una di e malatie croniche degenerative di l'articuli di l'osse à longu andà chì afecta a pupulazione anziana di più di 65 anni.
1]. In generale, i pazienti OA sò diagnosticati cun cartilagine dannata, sinovium inflamatu è condrociti erosi, chì provocanu u dolore è l'angoscia fisica.
2]. U dulore artriticu hè principarmenti causatu da a degenerazione di cartilagine in l'articuli per inflammazioni, è quandu u cartilagine hè seriamente danatu, l'osse ponu scontru cù l'altri causendu un dolore insupportable è difficultà fisiche.
3]. L'implicazione di mediatori inflammatorii cù sintomi cum'è u dulore, l'inflamazione è a rigidità di l'articulazione hè ben documentata. In i pazienti OA, i citochine inflamatorii, chì causanu l'erosione di u cartilagine è l'ossu subcondrale si trovanu in u fluidu sinoviale [1] .
4]. Dui lagnanza maiò chì i pazienti OA anu generalmente sò u dolore è l'inflammazione sinoviale. Dunque, l'ugettivi primari di e terapie OA attuale sò di riduce u dolore è l'infiammazione. [
5]. Ancu s'è i trattamenti OA dispunibuli, cumprese droghe non-steroidali è steroidali, anu pruvucatu l'efficacità in allughjendu u dulore è l'inflamazioni, l'usi à longu andà di sti droghe anu cunsiquenzi severi per a salute, cum'è disfunzioni cardiovascular, gastrointestinali è renali.
6]. Cusì, una medicina più efficace cù menu effetti secundari deve esse sviluppata per u trattamentu di l'artrosi.
I prudutti di salute naturali sò sempre più populari per esse sicuri è facilmente dispunibili [
7]. I medicini tradiziunali coreani anu dimustratu l'efficacità contr'à parechje malatie inflammatorii, cumprese l'artrite.
8]. Aucklandia lappa DC. hè cunnisciutu per e so proprietà medicinali, cum'è rinfurzà a circulazione di qi per alleviare u dolore è calmà u stomacu, è hè stata utilizata tradiziunale com'è analgésicu naturali.
9]. I rapporti precedenti suggerenu chì A. lappa pussede anti-inflammatory [
10,
11], analgésique [
12], anticancer [
13], è gastroprotettivi [
14] effetti. E diverse attività biologiche di A. lappa sò causate da i so cumposti attivi maiò: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone è costuslactone [1] .
15]. Studi precedenti dicenu chì u costunolide hà dimustratu proprietà antiinflamatorii in lipopolisaccharidi (LPS), chì inducevanu i macrofagi attraversu a regulazione di NF-kB è a via di a proteina di scossa di calore.
16,
17]. In ogni casu, nisun studiu hà investigatu l'attività potenziale di A. lappa per u trattamentu OA. A ricerca prisenti hà investigatu l'effetti therapeutic di A. lappa contra l'OA usendu (monosodium-iodoacetate) MIA è mudelli di roditori induvati da l'acidu acìticu.
Monosodium-iodoacetate (MIA) hè famosu utilizatu per pruduce assai di i cumpurtamenti di u dulore è e caratteristiche fisiopatologiche di l'OA in l'animali.
18,
19,
20]. Quandu injected in articuli di ghjinochje, MIA disarrays u metabolismu di i chondrocyte è induce inflammazioni è sintomi inflammatorii, cum'è cartilagine è erosione di l'osse subcondrali, i sintomi cardinali di OA.
18]. A risposta di writhing indotta cù l'acidu acìticu hè largamente cunsiderata cum'è a simulazione di u dulore perifericu in l'animali induve u dolore inflamatoriu pò esse misuratu quantitativamente.
19]. A linea cellulare di macrofagi di u mouse, RAW264.7, hè popularmente utilizata per studià e risposte cellulare à a inflamazioni. Dopu l'attivazione cù LPS, i macrofagi RAW264 attivanu e vie inflammatorii è secernenu parechji intermediari inflammatorii, cum'è TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS è IL-6.
20]. Stu studiu hà evaluatu l'effetti anti-nociceptive è antiinflamatorii di A. lappa contru OA in u modellu d'animali MIA, u modellu d'animali induvatu da l'acidu acìticu è e cellule RAW264.7 attivate da LPS.
2. Materiali è metudi
2.1. Materiale vegetale
A radica secca di A. lappa DC. utilizatu in l'esperimentu hè statu acquistatu da Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Corea). Hè statu identificatu da u prufessore Donghun Lee, Dipartimentu di Farmacologia Herbal, Col. di Medicina Coreana, Gachon University, è u numeru di specimen di voucher hè statu dipositu cum'è 18060301.
2.2. Analisi HPLC di A. lappa Extract
A. lappa hè stata estratta cù un apparatu di reflux (acqua distillata, 3 h à 100 ° C). A suluzione estratta hè stata filtrata è condensata cù un evaporatore à bassa pressione. L'estratto di A. lappa hà avutu un rendimentu di 44,69% dopu à a congelazione sottu à -80 ° C. L'analisi cromatografica di A. lappa hè stata realizata cù un HPLC cunnessu cù un sistema HPLC 1260 InfinityⅡ (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Per a separazione cromatica, a colonna EclipseXDB C18 (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) hè stata aduprata à 35 ° C. Un totale di 100 mg di u specimenu hè stata diluita in 10 mL di 50% metanol è sonicated per 10 min. I campioni sò stati filtrati cù un filtru di siringa (Waters Corp., Milford, MA, USA) di 0,45 μm. A cumpusizioni di a fase mobile era 0.1% d'acidu fosforicu (A) è acetonitrile (B) è a colonna hè stata elutata cusì: 0-60 min, 0%; 60-65 min, 100%; 65-67 min, 100%; 67-72 min, 0% solvent B cù un flussu di 1,0 mL/min. L'effluent hè statu osservatu à 210 nm utilizendu un volume d'iniezione di 10 μL. L'analisi hè stata fatta in triplicate.
2.3. Alloghju è gestione di l'animali
I topi maschili Sprague-Dawley (SD) di 5 settimane è i topi ICR maschili di 6 settimane sò stati acquistati da Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Corea). L'animali sò stati mantenuti in una stanza cù a temperatura constante (22 ± 2 ° C) è l'umidità (55 ± 10%) è un ciclu di luce / scuru di 12/12 h. L'animali anu familiarizatu cù a cundizione per più di una settimana prima di l'esperimentu. L'animali avianu un suministru ad libitum di alimentazione è acqua. E regule etiche attuali per a cura è a manipulazione di l'animali in l'Università Gachon (GIACUC-R2019003) sò state strettamente seguite in tutti i prucessi sperimentali animali. U studiu hè statu cuncepitu cù un investigatore cecu è prucessu parallelu. Avemu seguitu u metudu di l'eutanasia secondu e linee guida di u Cumitatu d'Etica Sperimentale Animale.
2.4. MIA Iniezione è Trattamentu
Rats sò stati separati aleatoriamente in 4 gruppi, à dì sham, cuntrollu, indometacina è A. lappa. Essendu anestetizzati cù una mistura di 2% isofluorane O2, i rati sò stati injectati cù 50 μL di MIA (40 mg / m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-articularly in l'articuli di ghjinochju per guidà à l'OA sperimentale. I trattamenti sò stati realizati cum'è quì sottu: i gruppi di cuntrollu è sham sò stati mantinuti solu cù a dieta basica AIN-93G. Solu, u gruppu indometacina hè stata furnita cù indometacina (3 mg / kg) incorporata in a dieta AIN-93G è A. lappa 300 mg / kg gruppu hè stata assignata à a dieta AIN-93G supplementata cù A. lappa (300 mg / kg). I trattamenti sò cuntinuati per 24 ghjorni da u ghjornu di l'induzione di l'OA à a tarifa di 15-17 g per 190-210 g di pesu di corpu nantu à una basa di ogni ghjornu.
2.5. Misurazione di u pesu
Dopu à l'induzione di OA, a misurazione di a capacità di pisanti di i membri posteriori di i rati hè stata realizata cù l'incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) cum'è programatu. A distribuzione di pesu nantu à i membri posteriori hè stata calculata: capacità di supportu di pesu (%)