L'osteoartrite (OA) hè una di e malatie degenerative croniche di l'osse è di l'articulazioni à longu andà chì affetta a pupulazione anziana di più di 65 anni.
1]. In generale, i pazienti cun OA sò diagnosticati cun cartilagine dannighjata, sinovia infiammata è condrociti erosa, chì scatenanu dolore è distress fisicu [
2]. U dulore artriticu hè principalmente causatu da a degenerazione di a cartilagine in l'articuli per via di l'inflammazione, è quandu a cartilagine hè seriamente dannighjata, l'osse ponu scontrassi trà di elle, causendu dulore insopportabile è difficultà fisiche [
3]. L'implicazione di mediatori inflammatori cù sintomi cum'è u dolore, u gonfiore è a rigidità di l'articulazione hè ben documentata. In i pazienti cun OA, e citochine inflammatorie, chì causanu l'erosione di a cartilagine è di l'ossu subcondrale, si trovanu in u fluidu sinoviale [
4]. Dui lagnanze maiò chì i pazienti cun OA anu generalmente sò u dolore è l'inflammazione sinoviale. Dunque, l'ubbiettivi principali di e terapie attuali per l'OA sò di riduce u dolore è l'inflammazione.
5]. Ancu s'è i trattamenti dispunibili per l'OA, cumpresi i medicinali non steroidali è steroidali, anu dimustratu efficacia per alleviare u dolore è l'inflammazione, l'usi à longu andà di sti medicinali anu cunsequenze gravi per a salute cum'è disfunzioni cardiovascolari, gastrointestinali è renali [
6]. Cusì, una medicina più efficace cù menu effetti secundarii deve esse sviluppata per u trattamentu di l'artrosi.
I prudutti di salute naturali sò sempre più populari per esse sicuri è facilmente dispunibili
7]. E medicine tradiziunali coreane anu dimustratu efficacia contr'à parechje malatie infiammatorie, cumprese l'artrite [
8]. Aucklandia lappa DC. hè cunnisciuta per e so proprietà medicinali, cum'è u miglioramentu di a circulazione di u qi per alleviare u dolore è calmà u stomacu, è hè stata aduprata tradiziunalmente cum'è analgesicu naturale [
9]. Rapporti precedenti suggerenu chì A. lappa pussede antiinflamatori [
10,
11], analgesicu [
12], anticancerosu [
13], è gastroprotettivu [
14] effetti. E diverse attività biologiche di A. lappa sò causate da i so principali cumposti attivi: costunolide, lattone di deidrocostu, diidrocostunolide, costuslactone, α-costol, lattone di saussurea è costuslactone [
15]. Studi precedenti sustenenu chì u costunolide hà dimustratu proprietà antiinflamatorie in u lipopolisaccaride (LPS), chì hà induttu i macrofagi per via di a regulazione di NF-kB è di a via di e proteine di shock termicu [
16,
17]. Tuttavia, nisun studiu hà investigatu l'attività putenziali di A. lappa per u trattamentu di l'OA. A ricerca attuale hà investigatu l'effetti terapeutichi di A. lappa contr'à l'OA utilizendu mudelli di roditori indotti da (iodoacetatu monosodicu) MIA è acidu aceticu.
U iodoacetatu monosodicu (MIA) hè cunnisciutu per pruduce parechji cumpurtamenti di u dolore è e caratteristiche patofisiologiche di l'OA in l'animali.
18,
19,
20]. Quandu hè iniettatu in l'articuli di u ghjinochju, MIA disturba u metabolismu di i condrociti è induce inflammazioni è sintomi inflammatori, cum'è l'erosione di a cartilagine è di l'ossu subcondrale, i sintomi cardinali di l'OA [
18]. A risposta di contorsione indotta cù l'acidu aceticu hè largamente cunsiderata cum'è a simulazione di u dolore perifericu in l'animali induve u dolore inflammatoriu pò esse misuratu quantitativamente [
19]. A linea cellulare di macrofagi di topo, RAW264.7, hè aduprata popularmente per studià e risposte cellulari à l'inflammazione. Dopu l'attivazione cù LPS, i macrofagi RAW264 attivanu e vie infiammatorie è secretanu parechji intermediari infiammatori, cum'è TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS è IL-6 [
20]. Questu studiu hà valutatu l'effetti antinocicettivi è antiinflamatori di A. lappa contr'à l'OA in u mudellu animale MIA, u mudellu animale induttu da l'acidu aceticu è e cellule RAW264.7 attivate da LPS.
2. Materiali è Metodi
2.1. Materiale Vegetale
A radica secca di A. lappa DC. aduprata in l'esperimentu hè stata acquistata da Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Corea). Hè stata identificata da u prufessore Donghun Lee, Dipartimentu di Farmacologia Erboristica, Culleu di Medicina Coreana, Università Gachon, è u numeru di campione di u voucher hè statu dipusitatu cum'è 18060301.
2.2. Analisi HPLC di l'estrattu di A. lappa
A. lappa hè stata estratta cù un apparecchiu di reflux (acqua distillata, 3 ore à 100 °C). A suluzione estratta hè stata filtrata è condensata cù un evaporatore à bassa pressione. L'estrattu di A. lappa hà avutu un rendimentu di 44,69% dopu a liofilizazione à -80 °C. L'analisi cromatografica di A. lappa hè stata realizata cù un HPLC cunnessu cù un sistema HPLC 1260 InfinityⅡ (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Per a separazione cromatica, a colonna EclipseXDB C18 (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) hè stata aduprata à 35 °C. Un totale di 100 mg di u campione hè statu diluitu in 10 mL di metanolu à 50% è sonicatu per 10 min. I campioni sò stati filtrati cù un filtru à siringa (Waters Corp., Milford, MA, USA) di 0,45 μm. A cumpusizione di a fase mobile era 0,1% d'acidu fosforicu (A) è acetonitrile (B) è a colonna hè stata eluita cum'è seguita: 0-60 min, 0%; 60-65 min, 100%; 65-67 min, 100%; 67-72 min, 0% di solvente B cù una velocità di flussu di 1,0 mL/min. L'effluente hè statu osservatu à 210 nm aduprendu un vulume d'iniezione di 10 μL. L'analisi hè stata realizata in triplicatu.
2.3. Alloghju è Gestione di l'Animali
I ratti Sprague-Dawley (SD) masci di 5 settimane è i topi ICR masci di 6 settimane sò stati acquistati da Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Corea). L'animali sò stati tenuti in una stanza cù una temperatura custante (22 ± 2 °C) è umidità (55 ± 10%) è un ciclu luce/scurità di 12/12 ore. L'animali sò stati familiarizati cù a cundizione per più di una settimana prima di l'iniziu di l'esperimentu. L'animali avianu una pruvista ad libitum di mangime è acqua. L'attuali regule etiche per a cura è a manipulazione di l'animali à l'Università Gachon (GIACUC-R2019003) sò state seguitate strettamente in tutte e procedure sperimentali animali. U studiu hè statu cuncipitu in cecu da u ricercatore è in un studiu parallelu. Avemu seguitu u metudu di l'eutanasia secondu e linee guida di u Cumitatu Eticu Sperimentale Animale.
2.4. Iniezione è trattamentu di MIA
I ratti sò stati divisi à casu in 4 gruppi, vale à dì sham, cuntrollu, indometacina è A. lappa. Essendu anestetizzati cù una mistura di isofluoranu O2 à 2%, i ratti sò stati iniettati cù 50 μL di MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-articularemente in l'articuli di u ghjinochju per purtà à OA sperimentale. I trattamenti sò stati realizati cum'è quì sottu: i gruppi di cuntrollu è sham sò stati mantenuti solu cù a dieta basica AIN-93G. Solu, u gruppu indometacina hè statu furnitu cù indometacina (3 mg/kg) incorporata in a dieta AIN-93G è u gruppu A. lappa 300 mg/kg hè statu assignatu à a dieta AIN-93G supplementata cù A. lappa (300 mg/kg). I trattamenti sò stati cuntinuati per 24 ghjorni dapoi u ghjornu di l'induzione di OA à u ritmu di 15-17 g per 190-210 g di pesu corpurale ogni ghjornu.
2.5. Misurazione di u pesu di u supportu
Dopu l'induzione di l'OA, a misurazione di a capacità portante di i membri posteriori di i ratti hè stata effettuata cù l'incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) cum'è previstu. A distribuzione di u pesu nantu à i membri posteriori hè stata calculata: capacità portante (%)
